譜析分享 自動(dòng)頂空進(jìn)樣-氣相色譜法開發(fā)出新應(yīng)用 厭氧菌活性檢測
我們每天都生活在被細(xì)菌包圍的世界里。不僅日常環(huán)境中時(shí)時(shí)刻刻都接觸到細(xì)菌，就連人體的皮膚表面和身體內(nèi)部特別是消化系統(tǒng)中也寄居著數(shù)以萬億計(jì)的細(xì)菌。其中多數(shù)是厭氧菌。正常情況下，這些細(xì)菌對(duì)人體無害，甚至對(duì)人體生長發(fā)育和身體健康有著不可缺少的作用。但是一旦皮膚、粘膜屏障功能減退或者菌群移位引起菌群失衡，厭氧菌就會(huì)引發(fā)感染，對(duì)健康造成危害。
厭氧菌幾乎可以感染所有的組織器官，導(dǎo)致口腔感染、闌尾炎、中耳炎、骨髓炎還有敗血癥、破傷風(fēng)等多種疾病，有些疾病還會(huì)危及生命。針對(duì)厭氧菌感染的主要治療方式是廣譜抗菌療法，即利用廣譜抗生素，如青霉素、阿莫西林、氧氟沙星等進(jìn)行治療。
隨著厭氧菌的耐藥性越來越強(qiáng)，基于經(jīng)驗(yàn)的傳統(tǒng)廣譜抗菌療法的適用性已經(jīng)開始變得越來越低，經(jīng)常出現(xiàn)臨床治療失敗的情況。為了解決這一問題就需要建立基于試驗(yàn)和檢測的抗厭氧菌藥物藥效評(píng)價(jià)方法，準(zhǔn)確判斷藥物的抗厭氧活性。然而厭氧菌的培育需要低氧或者無氧的環(huán)境，而且厭氧菌生長緩慢，因此候選藥物的抗厭氧試驗(yàn)往往成本很高而且效果不佳。
近日，武漢植物園的研究團(tuán)隊(duì)開發(fā)了一種利用頂空-氣相色譜法（HS-GC-TCD）測定候選藥物抗厭氧活性的新方法。這種方法利用厭氧菌代謝產(chǎn)生酸的特點(diǎn)，將培養(yǎng)基中的代謝酸度作為厭氧菌活性的測試指標(biāo)。代謝酸與碳酸氫鈉反應(yīng)，完全轉(zhuǎn)化為二氧化碳，然后用HS-GC-TCD檢測二氧化碳的含量。該方法對(duì)細(xì)胞活性反應(yīng)更靈敏，可以極大地增加抗厭氧活性檢測的精度（相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差低于5%），而且可以減少交叉污染，適合于抗厭氧活性的多種藥物的常規(guī)篩選。
頂空-氣相色譜法又稱液上氣相色譜分析法，將頂空進(jìn)樣器與氣相色譜儀相連。其中頂空進(jìn)樣器可專一性收集樣品中的易揮發(fā)性成分或者萃取吸附氣體樣品然后直接導(dǎo)入氣相色譜儀進(jìn)行分離和檢測，簡單實(shí)用。頂空-氣相色譜法目前已經(jīng)在環(huán)境檢測、食品、藥品中有機(jī)殘留溶劑檢測等方面有廣泛的應(yīng)用。研究團(tuán)隊(duì)開發(fā)出的新方法不僅為抗厭氧藥物提供了有效的藥效評(píng)價(jià)工具，也為頂空-氣相色譜法開拓了新的應(yīng)用領(lǐng)域。
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